實驗目的:本實驗旨在利用凈信全自動組織研磨儀對骨骼和動物組織(脾組織和肌肉組織)進行高效、均勻的研磨,以提取高質量的DNA、RNA或蛋白,為后續的分子生物學實驗提供優質的樣本。
實驗前的準備:
骨骼:準備新鮮的動物骨骼若干,確保無雜質和多余肌肉附著。
脾組織和肌肉組織:準備新鮮的脾組織和肌肉組織若干,去除脂肪和結締組織。
研磨儀:凈信全自動組織研磨儀(型號:JXFSTPRP-24L)一臺,確保設備狀態良好,無故障。
耗材:2ml離心管、2mm氧化鋯珠子、50ml不銹鋼研磨罐、液氮等。
全自動組織研磨儀實拍
實驗步驟:
一、脾和肌肉組織的研磨:
組織處理:將脾組織和肌肉組織分別切成小塊,放入2ml離心管中。確保組織塊大小適中,以便于研磨。
添加珠子:向每個離心管中加入適量的2mm氧化鋯珠子。珠子數量根據組織量而定,一般需覆蓋組織表面。
研磨操作:將裝有組織和珠子的離心管放入凈信全自動組織研磨儀中,按照以下參數設置進行研磨:30s重復幾次(具體次數根據組織硬度而定),間隔10s,頻率65HZ。
檢查研磨效果:研磨完成后,取出離心管,觀察組織是否研磨均勻。如有需要,可再次進行研磨。
實驗效果:
脾和肌肉組織樣品研磨前后效果圖
二、骨骼的研磨:
骨骼處理:將一整根的骨頭用鉗子處理成小塊,確保每塊骨頭大小適中,便于研磨。
干燥處理:使用紙巾或吸水紙將骨骼表面的水分吸干,確保研磨過程中無水分干擾。
液氮浸泡:將裝有骨骼的不銹鋼研磨罐旋上蓋子,放入液氮中浸泡幾分鐘,直至研磨罐內不再冒泡。此步驟有助于降低骨骼硬度,提高研磨效率。
研磨操作:取出研磨罐,立即放入凈信全自動組織研磨儀中,按照以下參數設置進行研磨:30s,間隔10s,頻率50HZ。注意,由于骨骼硬度較高,研磨過程中可能會產生較大噪音,需做好防護措施。
檢查研磨效果:研磨完成后,取出研磨罐,觀察骨骼是否研磨均勻。如有需要,可再次進行研磨。
實驗效果:
骨骼樣品研磨前后效果圖
總結:
本次實驗利用凈信全自動組織研磨儀對骨骼和動物組織進行了高效、均勻的研磨,成功提取了高質量的DNA、RNA或蛋白。實驗過程中,我們注意到以下幾點:
對于脾和肌肉組織,通過添加適量的氧化鋯珠子可以提高研磨效果。珠子數量和組織量需匹配,以確保研磨均勻。
對于骨骼的研磨,液氮的浸泡是關鍵步驟。通過降低骨骼硬度,可以提高研磨效率并減少噪音。
在處理組織量特別少的情況下,使用小珠子進行研磨可以獲得更細的研磨效果。
在進行骨骼研磨前,一定要將骨骼表面的水分吸干,以避免研磨過程中產生冰晶干擾研磨效果。
通過本次實驗,我們再次掌握了凈信全自動組織研磨儀的使用方法,并成功應用于骨骼和動物組織的研磨。這為后續的分子生物學實驗提供了可靠的樣本,也為公司藥物研發工作提供了有力支持。