多年的生化、遺傳學(xué)及分子分析研究所得的大量研究結(jié)果,使酵母成為生物制藥研究者首選的模式生物系統(tǒng)和工具。因此,酵母成為普遍的基因表達(dá)研究和重組蛋白的常見載體。盡管研究用的酵母種屬有多種,包括畢赤酵母屬、漢遜酵母屬和德巴利氏酵母屬,但最常用的還是酵母菌屬。
使用傳統(tǒng)的酶分解法通常很難從細(xì)胞中提取完整的酵母mRNA和細(xì)胞內(nèi)蛋白。裂解酶通常是粗制備,包含的RNA酶和蛋白酶不僅會破壞細(xì)胞壁,還會破壞目標(biāo)分子。而且,酶裂解出原生質(zhì)體通常需要加入去垢劑,而去垢劑會造成多種蛋白質(zhì)失活。因此,機械裂解或破壞酵母細(xì)胞通常需要釋放一些小分子。
1、破碎前的準(zhǔn)備:
0.1g菌體(本實驗以0.1g菌體為例);鋼珠;研磨機(選用品牌上海凈信科技Tissulyser-24);研磨罐。
2、研磨:
0.1g菌體加入30ML PBS溶液,混勻后用移液器均勻滴入液氮中,收集液氮凍住的小球,將小球放入上海凈信科技預(yù)冷過的研磨罐中,調(diào)整頻率,震蕩時間。取下研磨罐再次放入液氮預(yù)冷取出來再次上機研磨
研磨現(xiàn)場圖
-
溫控型全自動單細(xì)胞懸液儀
-
全自動樣品快速研磨儀-24L
-
全自動樣品快速研磨儀-32L
-
全自動樣品快速研磨儀-48L
-
全自動樣品快速研磨儀-64L
-
全自動樣品快速研磨儀-96L
-
全自動樣品快速磨樣儀
-
全自動樣品快速研磨儀
-
全自動錘式旋風(fēng)磨
-
全自動樣品快速研磨儀
-
全自動樣品快速研磨儀
-
全自動均質(zhì)儀
-
全自動多探頭均質(zhì)儀
-
全自動翻轉(zhuǎn)式振蕩器
-
全自動均質(zhì)器
-
全自動低溫翻轉(zhuǎn)式振蕩器
-
全自動樣品快速研磨機
-
全自動毛發(fā)清洗儀
-
水質(zhì)COD全自動智能分析工作站
-
土壤有機質(zhì)全自動智能分析工作站
-
全自動樣品快速研磨儀-192
-
全自動樣品快速研磨儀-96
-
全自動樣品快速研磨機-64
-
全自動樣品快速研磨機-48
-
全自動樣品快速研磨儀-32
-
全自動樣品快速研磨機
-
全自動樣品快速研磨儀
-
全自動樣品快速研磨儀-24
-
全自動液氮冷凍研磨機
-
pH全自動智能分析工作站
-
全自動低溫樣品處理系統(tǒng)
-
全自動聲波骨骼脫鈣機
-
全自動浸入式液氮冷凍研磨儀
-
土壤有機質(zhì)全自動智能分析工作站
-
全自動浸入式液氮冷凍研磨儀
-
全自動低溫快速研磨儀
-
全自動樣品快速低溫研磨儀